四川农业大学

动物传染病学（实践）

一、实训目的

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通过本单元课业训练指导，以期达到以下实训目的：(1)培养学生独立思考和设计的能力。学生实习前查阅相关资料，自己设计实验。(2)提升动手能力：学生分小组，自己动手开展实验。(3)提升学生分析问和解决问题的能力。学生对实验中遇到的问题自己进行讨论和分析，在老师的引导下，寻找解决问题的方案；学生对实验结果进行认真分析和总结。(4)以四川主要的规模化养殖动物猪、鸡的传染病的实验室诊断为例，培养和掌握动物传染病的实验室综合诊断技能。

三、实验考核要求

（1）教学实习前认真查阅有关资料，然后以组为单位提交一份实验设计；（2）教师审核和修改实验设计，与学生商量后确定每组的实验方案；（3）每组按实验方案的内容准备实验材,实验材料准备完毕方可，进行正式实验；（4）整个实验过程，以学生为主，学生自主设计，自己动手，收集整理实验数据；

四、实验内容

1. 猪细菌性病的诊断实践

1.1.实验方案的撰写：查阅文献，独立撰写“猪细菌病的诊断”综合实验方案；

1.2.材料的准备：

（1）临床病料收集：收集临床发病猪病料（或病猪），用于分离细菌。

（2）培养基的制备（鲜血培养基、普通培养基、麦康凯培养基、TSA培养基等）；

1.3.临床发病猪的剖检；

1.4.细菌的培养与鉴定：

（1）病料的接种（用不同的培养基，同时进行心、肝、脾、肺、肾、肠道的细菌接种）；

（2）细菌的培养（厌氧、需氧）；

（3）细菌的鉴定（培养特性鉴定、染色特性鉴定、16sRNA鉴定、致病性鉴定、耐药性鉴定，等。）

1.5.实习报告的撰写：总结实验结果，分析实验数据，讨论分析实验结果，形成综合的实验报告

2. 鸡病毒病的实验室诊断实践

2.1.实验方案的撰写：查阅文献，独立撰写“鸡呼吸道病毒的分离鉴定”综合实验方案；

2.2.材料的准备：

（1）病料收集：收集临床发病鸡病料（或病鸡），用于分离病毒。

（2）鸡胚的孵化：购买SPF鸡胚，孵化至9-11日龄；

2.3.临床发病鸡的剖检；

2.4.病毒的分离与鉴定：

（1）病料的采集（呼吸道疾病一般采集气管、肺）；

（2）病料的处理（研磨、反复冻融、离心、过滤除菌）；

（3）病料的鸡胚接种（绒毛尿囊腔、绒毛尿囊膜）

（4）病毒的鉴定(培养特性的鉴定如鸡胚死亡时间，胚体出血情况，胚体发育情况、尿囊液颜色的变化等；理化特性的鉴定如血凝性；核酸鉴定：PCR或RT-PCR扩增靶基因、PCR产物的测序、序列比对等

2.5.实习报告的撰写：总结实验结果，分析实验数据，讨论分析实验结果，形成综合的实验报告

五、实习指导书或参考书或参考网站

教材名称、作者（译者）、出版社、出版时间

1.《兽医传染病学实验指导》，陈溥言（南京农业大学）主编，中国农业出版社,2015.

2.《兽医微生物学实验指导》，姚火春（南京农业大学）主编，中国农业出版社,2002.

3.OIE: Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (http:// www.oie.int/en/standard-setting/terrestrial-manual/access-online/)